Культивирование хламидий в куриных эмбрионах
- Пациент со стажем
- Сообщения: 108
- Возраст: 33
- Зарегистрирован: Ср янв 09, 2019 11:06 am
Поблагодарили: 1 раз
ными животными:
1. Высокая чувствительность к широкому спектру вирусов (это
объясняется недостаточным развитием защитных механизмов, не об-
разуют антител в ответ на заражение).
2. Легкодоступный объект (большое количество птицефабрик и
инкубаториев).
3. Стерильность (так как скорлупа и подскорлупная оболочка
надежно защищают эмбрионы от бактериального заражения со сто-
роны внешней среды). Однако нельзя полностью исключить содер-
жание в них патогенных агентов (вирусного бронхита кур, гриппа,
лейкоза, ньюкаслской болезни и др.).
4. Экономичны (дешевы, не требуют ухода, кормления).
В вирусологии куриные эмбрионы используют:
1) для обнаружения в биологическом материале активного ви-
руса биопробой;
2) первичного выделения вируса и его культивирования;
3) поддержания вирусов в лаборатории в активном состоянии;
4) титрования вирусов;
5) накопления большой массы вирусов для лабораторных ис-
следований при производстве вакцин и диагностических тест-систем;
6) как тест-объект в реакции нейтрализации.
Эмбрионы доставляют из инкубатория, не допуская их охлажде-
ния в пути. В лаборатории эмбрионы инкубируют в термостате при
температуре 37° С и влажности 60-70 %, что достигается установле-
нием в термостате открытых широкогорлых сосудов с водой. Венти-
ляционные отверстия термостата должны быть открыты. Эмбрионы
размещают воздушной камерой вверх в специальных штативах. Ре-
комендуется до момента заражения дать возможность эмбрионам в
течение суток адаптироваться к новым условиям и нормализовать
свои функции после транспортного стресса. Если лаборатория распо-
лагает собственным инкубаторием, то снесенные курицей оплодотво-
ренные яйца пригодны для закладки в него в течение 10 дней.
Подготовка куриных эмбрионов к заражению включает овоско-
пирование и дезинфекцию скорлупы, а также соответствующую под-
готовку рабочего места. Овоскопирование представляет собой про-
смотр яиц против достаточно яркого источника света (овоскоп), в ре-
зультате чего на неосвещенной стороне скорлупы образуются тени от
внутренних структур
Заражение в желточный мешок.
Большей частью им пользуются для размно-
жения хламидий, а также вирусов болезни Марека,
ринопневмонии лошадей, катаральной лихорадки
овец и др. Заражают эмбрионы 5-7-дневного, а ино-
гда и 2-3-дневного возраста (вирус лихорадки до-
лины РИФ). Используют два варианта заражения.
Первый вариант. Эмбрионы помещают в штатив в вертикаль-
ном положении. Делают отверстие в скорлупе над центром воздуш-
ной камеры и вводят иглу на глубину 3,5-4 см под углом 45° к верти-
кальной оси в направлении, противоположном месту нахождения за-
родыша (рис. 7).
Второй вариант. Иногда аналогичный путь заражения осу-
ществляется на горизонтально укрепленном в штативе эмбрионе; при
этом зародыш находится внизу, а желток над ним. Отверстие в скор-
лупе закрывают каплей расплавленного парафина (см. рис. 4).
- Пациент со стажем
- Сообщения: 108
- Возраст: 33
- Зарегистрирован: Ср янв 09, 2019 11:06 am
Поблагодарили: 1 раз
Для выделения из уретры и шейки матки и культивирования его в желточном мешке куриных эмбрионов необходимо иметь условия, обеспечивающие стерильную работу. Материалом для выделения служат соскобы из уретры и шейки матки, которые предварительно микроскопируют с целью обнаружения элементарных телец и внутриклеточных включений.
Использование вирусоскопии и цитоскопии иногда уже позволяет установить хламидийную природу цервицитов и уретритов. Но чаще всего наряду с этим необходимо производить заражение развивающихся 7-8 дневных куриных эмбрионов.
Соскобы из уретры, шейки матки женщин и уретры мужчин берут по возможности стерильно по общеизвестной методике.
Соскобный материал, полученный из урогенитального тракта больных помещают в пенициллиновые флаконы, содержащие по 2 мл изотонического раствора натрия хлорида или фосфатного буфера (pH 7,2) с антибиотиками: стрептомицина 500 ЕД/мл, ристомицина 125 ЕД/мл, мицерина 200 ЕД/мл и мономицина 250 ЕД/мл. Указанные выше антибиотики используют для борьбы с бактериальным загрязнением, то есть для очистки инокулята. Эти антибиотики заметно не влияют на жизнеспособность возбудителя урогенитальной инфекции.
Соскобный материал, помещенный в фосфатный буфер или изотонический раствор натрия хлорида с антибиотиками, не содержащий пенициллина, до заражения куриных эмбрионов может сохраняться при температуре -20 гр. ц. до 3 месяцев, а при 2 или 4 г.ц.
- не более 15 дней. Однако желательно, чтобы срок хранения инокуляров при 2 г.ц. или 4 г.ц. не превышал 7 дней.
Перед заражением куриных эмбрионов в желточный мешок, инокулят (соскобный материал) проверяют на стерильность, используя для этого мясопептонный и глюкозный бульоны, среды Сабуро, Китта-Тароцции и, для выявления микоплазм, полужидкий 0,3 % агар и триптический перевар бычьего сердца с 10% лошадиной неинактивированной сывороткой.
Инокуляты, инфицированные какой-либо микрофлорой, от которой не удалось освободиться с помощью антибиотиков, для заражения куриных эмбрионов не используются.
- Пациент со стажем
- Сообщения: 108
- Возраст: 33
- Зарегистрирован: Ср янв 09, 2019 11:06 am
Поблагодарили: 1 раз
https://fastpic.ru/view/112/2020/0526/_ ... b.jpg.html
https://fastpic.ru/view/112/2020/0526/_ ... 1.jpg.html
https://fastpic.ru/view/112/2020/0526/_ ... 8.jpg.html
Провожу эксперименты.
Первую партию испортил, у второй партии куриные эмбрионы развиваются, на 8 день произвел заражение в желточный мешок.
Посмотрим, что выйдет.
Самые полезнве материалы форума! За 18 лет форум стал очень большим! Авторы Форума сделали для Вас выжимки из более 10000 тем форума, проверенные за время работы проекта! ПОДРОБНОЕ РУКОВОДСТВО по лечению заболеваний мужской половой системы САМОСТОЯТЕЛЬНО - БЕЗ ЛИШНИХ ЗАТРАТ - Переход в основной раздел Hron-prostatit.ru ОН-ЛАЙН ТЕСТИРОВАНИЕ ПО СИМПТОМАМ - Узнай, что с тобой случилось - Быстро. Бесплатно, Без регистрации - Переход в основной раздел Hron-prostatit.ru ИЗБРАННЫЕ ПРОВЕРЕННЫЕ МАТЕРИАЛЫ - Самые информативные обсуждения отобраны в отдельный раздел - Клуб форума
Внимание! Информация на данном Форуме приводится в ознакомительных целях Имеются противопоказания. Проконсультируйтесь с врачом