Выявляем сами!!! Микроскоп (Микроскопия)

Anton · #21 Сообщение **Anton** » Чт окт 03, 2019 9:47 pm

[ref]Billy[/ref],

Billy писал(а):Источник цитаты Нужно обратить внимание на включения в эпителии во всех трех мазках.
https://i86.fastpic.ru/big/2019/1003/89 ... 3ebd532341 46f3eef4b0b689.jpg

Везде клетки эпителия поражены внутриклеточной инфекцией. Это могут быть вирусы, хламидии, микоплазмы, уреаплазмы. Хлам, мико и уреа тоже практически вирусы. То что вне клеток похоже на какие-то то ли кокки.

Billy писал(а):Источник цитаты Зуд в уретре.
Мазок из уретры. Окраска по Грамму. Увеличение 1200 раз.
https://fastpic.ru/fullview/87/2019/100 ... tml?noht=1

Здесь у тебя тоже интересная картина, хлам по классике. В эпителиальной клетке по направлению 19 часов ретикульярное тельце хлам, плюс также клетка нашпигована элементарными тельцами хлама. На верху темное пятно похоже на амебовидную трихомонаду.

Billy · #22 Сообщение **Billy** » Чт окт 03, 2019 11:31 pm

[ref]Anton UG[/ref], хлам. Вне клеток - это диплококки, они непатогенны, узнавал у микробиолога.
Окраска по Граму, триха бы окрасилась в желтенький цвет.
Три раза делал ПИФ, все три раза положительно, хлам.
Никакие другие методы не показали, ни ПЦР, ни кровь, чего только не делал.
Купил люминисцентный микроскоп, сам еще проверю, сюда фотки скину.

Anton · #23 Сообщение **Anton** » Чт окт 03, 2019 11:40 pm

[ref]Billy[/ref],

Billy писал(а):Источник цитаты Вне клеток - это диплококки

Дипло это 2кокка вместе соединены, а у тебя по одному кокку.
https://fastpic.ru/fullview/86/2019/100 ... tml?noht=1

Anton · #24 Сообщение **Anton** » Чт окт 03, 2019 11:44 pm

Billy писал(а):Источник цитаты Зуд в уретре.
Мазок из уретры. Окраска по Грамму. Увеличение 1200 раз.
https://i87.fastpic.ru/big/2019/1003/33 ... aca033.jpg
https://i87.fastpic.ru/big/2019/1003/53 ... 8c0f53.jpg
https://i87.fastpic.ru/big/2019/1003/85 ... 7a4485.jpg
https://i87.fastpic.ru/big/2019/1003/41 ... 702e41.jpg
https://i87.fastpic.ru/big/2019/1003/31 ... 381431.jpg

Другое дело здесь. Здесь всё сплошняком в диплококках, помимо хлама.

Anton · #25 Сообщение **Anton** » Сб окт 05, 2019 7:10 pm

[ref]Billy[/ref],

Billy писал(а):Источник цитаты Окраска по Граму, триха бы окрасилась в желтенький цвет.

Откуда такая инфа? Это что-то новое. Окрасска по грамму окрашивает вроде бы только в синий, фиолетовый или розовый цвет.

В предыдущие разы, когда ты делал окраску метиленовым синим не было видно в деталях структурные повреждения клеток эпителия и внутриклеточных очагов инфекции (хлам, мико, уреа, вирусы ???), а так же диплококки не совсем были различимы. Да и увеличение было поменьше. Метиленовый синий и меньшее увеличение давало возможность различить только трихомонады. Но в новых фото вроде увеличение побольше, да и окраска по Грамму, это и дало возможно увидеть внутриклеточные очаги инфекций и структурные повреждения в клетках эпителия, да и диплококки более различимы.

Billy · #26 Сообщение **Billy** » Вс окт 06, 2019 6:37 am

[ref]Anton UG[/ref], в инструкции для окраски по Граму "ядра трихомонад - синие, сине-фиолетовые, цитоплазма трихомонад - желтая, оранжевая."
Я научился лучше красить мазки, достал 95% спирт, четкость фотографий выше, со штатива фотографировал.
Надо еще научится хорошо красить по Романовскому.

Anton · #27 Сообщение **Anton** » Вс окт 06, 2019 9:56 pm

[ref]Billy[/ref],

Billy писал(а):Источник цитаты в инструкции для окраски по Граму "ядра трихомонад - синие, сине-фиолетовые, цитоплазма трихомонад - желтая, оранжевая."

Типичный формы трих может и окашивает как в инструкции, а вот атипичные формы вряд ли. Хотя утверждать не буду, надо проверять. Повтори еще раз окраску по Грамму, но приближение уменьши, чтобы клетки было видно не впритык, а несколько удаленно, как ты делал при окраске метиленовым синим. Сделай фото, выложи сюда.

Anton · #28 Сообщение **Anton** » Вс окт 06, 2019 11:21 pm

Billy писал(а):Источник цитаты Купил люминесцентный микроскоп, через неделю у меня будет. Буду разбираться.

Реагенты для ПИФ/НПИФ знаешь где брать? Люминесцентный как раз для ПИФ/НПИФ.

Anton · #29 Сообщение **Anton** » Вс окт 06, 2019 11:28 pm

Народ, кто проживает в Москве, Питере, других городах, скооперируйтесь уже и купите в складчину обычные световые микроскопы (для простой микроскопии) и люминесцентные (для ПИФ/НПИФ) с реагентами и делайте себе микроскопии соскобов/мазков/спермы/секрета простаты/выделений и т.п. биоматериалов с разных мест с окрасками на стекле и выкладывайте сюда фото, будем разбирать у кого что. А то анализы в лабах не внушают доверия.
Микроскопы можно брать б/у на Авито, Юле и т.п., там подешевле.

Соблюдайте только меры по биозащите при проведении исследований.

Billy · #30 Сообщение **Billy** » Ср окт 16, 2019 10:56 pm

[ref]Anton UG[/ref], да, Галарт, только окраской хламидии трахоматис не подсвечивает, пневмония не пробовали, подсвечивает, только окраской хламидийными антигенами, получается, что это хламидия не трахоматис, еще куплю Хламислайд пневмония, проверим.

Anton · #31 Сообщение **Anton** » Пт окт 18, 2019 9:04 pm

Billy писал(а):Источник цитаты [ref]Anton UG[/ref], да, Галарт, только окраской хламидии трахоматис не подсвечивает, пневмония не пробовали, подсвечивает, только окраской хламидийными антигенами, получается, что это хламидия не трахоматис, еще куплю Хламислайд пневмония, проверим.

Я не знаю что ты имееш ввиду по окраской хламидий при которой они не подсвечивают (окраска чем) и что за окраска хламидийными антигенами. Под ПИФом имеется ввиду окрска флюоресцентными (ФИТЦ-меченными) антителами, к примеру ПИФ тестсистема Хламисайд трахоматис от компании Галарт Диагностикум.
http://www.galartdiag.ru/products/rif/1101
Ты делал ПИФ конкретно Хламислайдом трахоматис?

Billy · #32 Сообщение **Billy** » Сб окт 19, 2019 1:11 pm

[ref]Anton UG[/ref], я сам еще не делал. Это мне делал микробиолог в институте внутриклеточного симбиоза.
У них есть набор антител диагностических флюоресцирующих хламидий трахоматис и просто хламидий (метит любые хламидии).
Вот у меня обнаружены хламидии с помощью антител просто хламидий. Конкретно, не понятно, что это за хламидии.
Я недавно заказал Хламислайд пневмония, когда придет посылка, я схожу к микробиологу, чтобы он обработал мазок этим препаратом.
Люминесцентный микроскоп получил, еще нужно докупать светофильтры и светоделительные пластины для проведения анализов, сейчас пока нет денег, как скоплю деньжат, куплю.
Еще купил центрифугу для пробирок, 21 октября получу посылку с ней, сделаю микроскопию осадка эякулята, микроскопию осадка мочи.

Anton · #33 Сообщение **Anton** » Вс окт 20, 2019 4:24 pm

Billy писал(а):Я недавно заказал Хламислайд пневмония, когда придет посылка, я схожу к микробиологу, чтобы он обработал мазок этим препаратом.

Температура хранения и транспортировки +2 +8 градусов. Как они обеспечат эти условия при доставке Хламислайда?

Billy · #34 Сообщение **Billy** » Вс окт 20, 2019 6:59 pm

[ref]Anton UG[/ref],
1. Вскрывают флакон препарата «ХламиСлайд» с ФИТЦ-меченными хламидийными антителами, добавляют 1 мл дистиллированной воды и растворяют содержимое в течение 1-2 мин. при комнатной температуре, слегка встряхивая флакон. Растворенный реагент можно хранить в темноте при температуре +2..+8 °С в течение 10 суток. Допускается однократное его замораживание.
2. Высушенный мазок фиксируют 96 %-ным этанолом в течение 5 мин. или наносят на мазок 2-3 капли ацетона до полного его испарения. Стекло с фиксированным мазком может храниться при температуре +2-8°С в течение 10 суток.
Больше нигде не нашел условия хранения, наверно запечатанный можно хранить при комнатной.
Я написал им на почту, ответ продублирую тут.

Anton · #35 Сообщение **Anton** » Пн окт 21, 2019 12:10 am

[ref]Billy[/ref], Глянь на саму упаковку, на ней в верхнем правом углу указано Хранить при +2 +8 *С.
http://www.galartdiag.ru/products/rif/1101

Billy · #36 Сообщение **Billy** » Пн окт 21, 2019 7:14 am

[ref]Anton UG[/ref], увидел.
Посмотрим, что ответят, может отправили посылкой с температурным режимом.

Billy · #37 Сообщение **Billy** » Пн окт 21, 2019 1:44 pm

[ref]Anton UG[/ref], получил ответ.
"Добрый день, Андрей!
Наборы стабильны в течение 10 дней вне температурного режима.
С уважением, менеджер Екатерина. "

Anton · #38 Сообщение **Anton** » Вт окт 22, 2019 6:51 pm

Billy писал(а):я сам еще не делал. Это мне делал микробиолог в институте внутриклеточного симбиоза.
У них есть набор антител диагностических флюоресцирующих хламидий трахоматис и просто хламидий (метит любые хламидии).
Вот у меня обнаружены хламидии с помощью антител просто хламидий. Конкретно, не понятно, что это за хламидии.

Попробуй еще сам сделать ПИФ на хлам трахоматис. Я бы вообще на всё сам сделал ПИФы, раз уж люминисцентный микроскоп взял. Закупи ПИФ тест-системы Галард Диагностикум, у них там практически на все ИППП можно закупить:

Трихомонады http://www.galartdiag.ru/products/rif/1107
Хламидии трахоматис http://www.galartdiag.ru/products/rif/1101
Гонорея http://www.galartdiag.ru/products/rif/1110
Микоплазмы гениталиум http://www.galartdiag.ru/products/rif/1112
Микоплазмы хоминис http://www.galartdiag.ru/products/rif/1105
Уреаплазмы уралитикум http://www.galartdiag.ru/products/rif/1104

Anton · #39 Сообщение **Anton** » Вт окт 22, 2019 6:54 pm

Герпес 1 и 2 типов http://www.galartdiag.ru/products/rif/1113
Цитомегаловирус http://www.galartdiag.ru/products/rif/1111
Гарднереллы http://www.galartdiag.ru/products/rif/1108
Хламидии пневмони http://www.galartdiag.ru/products/rif/1103

Еще там у них какие то рекомбинатные ПИФ тест-системы. Чем они отличаются от обычных пока не знаю.

Billy · #40 Сообщение **Billy** » Вт окт 22, 2019 7:23 pm

[ref]Anton UG[/ref], можно на все ИППП сделать, но я сейчас хочу разобраться с хламидиями.
Все препараты сразу дорого покупать, денег скоплю, тогда может быть куплю.
Сейчас цель сделать анализ на хламидию пневмонию. Еще попрошу у микробиолога хламидийный препарат(метит любые хламидии).
Сделать микроскопию осадка эякулята, осадка мочи. Центрифуга пришла, на днях заберу.

С помощью люминесцентного микроскопа можно много разный исследований выполнять.
Вот например с помощью красителя акридинового желтого:
Выявление трихомонад (по А. Б. Деражне, 1961)
Реактивы.
1. Основной раствор АО 1:1000.
2. Рабочий раствор АО — разведение 1:40 000 на фосфатном буфере pH 7,0.
Ход определения.
На край чистого предметного стекла наносят исследуемый материал, делают тонкий мазок, высушивают. Хранить препарат можно в сухом темном месте длительное время. Перед исследованием на мазок наносят несколько капель рабочего раствора АО. На препарат накладывают покровное стекло, избыток краски отсасывают фильтровальной бумагой, микроскопируют.
Трихомонады меньше клеток плоского эпителия и больше лейкоцитов. Ядро вытянутое, овальной формы, светится зеленым или желто-оранжевым цветом. Цитоплазма кирпично-красная, иногда желто-коричневая. Люминесцентная микроскопия трихомонад позволяет обнаружить их чаще, чем при обычных методах цитологического исследования.